氮含量測定-檢測氮含量的方法你掌握了嗎？

　　一、材料：各種干燥、過(guò)篩(60～80目)的植物樣品
 

　　二、儀器設備：消化管； 定氮蒸餾裝；三角燒瓶；微量滴定管； 量筒；容量瓶；燒杯；移液管等。
 

　　三、植物樣品中氮元素含量檢測實(shí)驗步驟：
 

　　1、樣品提取分離：準確稱(chēng)取烘至恒重的樣品0.1000g～0.5000g(依樣品含氮量而定，含氮1～3mg宜)，置10ml離心管中，加入5ml5%三氯yi酸，90℃水浴中浸提15min，不時(shí)攪拌，取出后用少量蒸餾水沖洗玻棒，待溶液冷卻后，4000rpm離心15min，上清液棄去。并用5%三氯yi酸洗沉淀2～3次，離心，棄去上清液，后用蒸餾水將沉淀無(wú)損地洗入鋪有濾紙的漏斗上，去掉濾液后，將沉淀和濾紙在50℃下烘干，用于蛋白氮的測定。
 

　　2、樣品的消化：取4支消化管編號。1號管直接放入稱(chēng)好的材料用于測定總氮，2號管放入上述烘干的濾紙和沉淀，用于蛋白氮的測定，3號管放入同樣濾紙一張、4號管不加任何樣品作為空白對照，注意將樣品放入消化管底部。向各消化管加濃硫酸5ml，混合催化劑0.3g～0.5g，將樣品浸泡數h或放置過(guò)夜后，在管口蓋一小漏斗，放在遠紅外消煮爐上加熱消化。開(kāi)始時(shí)溫度可稍低，以防止內容物上升至管口。泡沫多時(shí)，可從小漏斗加入2～3滴無(wú)水yi醇。到管口出現白色霧狀物時(shí)，泡沫已不再產(chǎn)生；此時(shí)可逐漸升溫，使內容物達到微沸。直到消化液變?yōu)榍宄和该鳛橹?。消化過(guò)程中，若在消化管上部發(fā)現有黑色顆粒時(shí)，應小心地轉動(dòng)消化管，用消化液將它沖洗下來(lái)，以保證樣品消化*。消化過(guò)程約需2～3h。
 

　　3、定容消化完畢待溶液冷卻后，沿管壁仔細加入10ml左右無(wú)氨蒸餾水，以沖洗管壁，再將消化液小心轉入100ml容量瓶中。以無(wú)氨水少量多次沖洗消化管，洗滌液并入容量瓶。冷卻后用無(wú)氨水定容至刻度，混勻備用。
 

　　4、蒸餾及滴定 以下幾步進(jìn)行：
 

　　A、儀器的洗滌：先經(jīng)一般洗滌后，還要用水蒸氣洗滌?？砂聪铝蟹椒ㄟM(jìn)行蒸氣洗滌。先在蒸氣發(fā)生器中加入2/3體積的蒸餾水(事先加入幾滴濃硫酸，使其酸化，加入甲基紅指示劑，并加入少許沸石或毛細玻璃管以防止爆沸)。打開(kāi)漏斗下的夾子，用電爐或酒精爐加熱至沸騰，使水蒸氣通入儀器的各個(gè)部分，以達到清洗的目的。在冷凝管下端放置一個(gè)三角瓶接收冷凝水。然后關(guān)緊漏斗下的夾子，繼續用蒸氣洗滌5min。沖洗完畢，夾緊蒸氣發(fā)生器與收集器之間的連接橡膠管，蒸餾瓶中的廢液由于減壓而倒吸進(jìn)入收集器，打開(kāi)收集器下端的活塞排除廢液。如此清洗2～3次，再在冷凝管下端換放一個(gè)盛有硼酸-指示劑混合液的三角瓶，使冷凝管下口*浸沒(méi)在液面以下0.5cm處，蒸餾1～2min，觀(guān)察三瓶?jì)鹊娜芤菏欠褡兩?。如不變色，表示蒸餾裝置內部已洗干凈。移去三角瓶，再蒸餾1～2min，用蒸餾水沖洗冷凝管下口，關(guān)閉電爐，儀器即可供測定樣品使用。
 

　　B、標準硫酸銨測定為了熟悉蒸餾和滴定的操作技術(shù)，并檢驗實(shí)驗的準確性，找出系統誤差，常用已知濃度的標準硫酸銨測試三次。在三角瓶中加入20ml硼酸-指示劑混合液，將此三角瓶承接在冷凝管下端，并使冷凝管的出口浸入溶液中。注意在加樣前務(wù)必打開(kāi)收集器活塞，以免三角瓶?jì)纫后w倒吸。準確吸取2ml硫酸銨標準溶液，加到漏斗中。
 

　　四、結果計算
 

　　樣品中總氮量(%)=0.010×(V3—V0)×100×14/(W×1000×10)×100×氮的回收率
 

　　樣品中蛋白氮含量(%)=0.0100×(V1-V2-V0)×100×14/(W×5×1000)×100×氮的回收率
 

　　回收率(%)=0.0100×(V-V0)×14/(2.0×0.6×100)×100