如何使用凱氏定氮儀才能保證結果的準確

　　全自動(dòng)凱氏定氮儀作為測定蛋白質(zhì)的儀器，廣泛應用于乳與乳制品中蛋白質(zhì)的含量的測定。全自動(dòng)凱氏定氮儀具有高靈敏度，分析速度快，應用范圍廣，所需試樣少，設備和操作比較簡(jiǎn)單等特點(diǎn) 它是目前使用廣泛測定乳與乳制品中蛋白質(zhì)的儀器。

　　嚴格按照說(shuō)明書(shū)和儀器操作規程的要求，進(jìn)行規范操作，這是正確使用和科學(xué)保養儀器的前提。

　　1、開(kāi)機之前，保證各個(gè)溶液能夠滿(mǎn)足此次試驗測定，檢查去離子水，堿液和接收液的使用情況，以及廢液桶中廢液得到了及時(shí)的清理。如果在去離子水，堿液和接收液的液位低于液位傳感器的話(huà)，或廢液的液位高于液位傳感器的話(huà)，儀器將報警，正在進(jìn)行的試驗將被停止，影響測定工作的正常進(jìn)行。

　　2、開(kāi)機之前，保證冷卻水的開(kāi)關(guān)是打開(kāi)了。如果冷卻水開(kāi)關(guān)關(guān)閉，儀器雖然能自檢通過(guò)，但是在蒸餾過(guò)程中，由于蒸餾裝置的溫度太高，儀器將報警，提示打開(kāi)冷卻水開(kāi)關(guān)。打開(kāi)冷卻水開(kāi)關(guān)后，儀器將繼續工作。但此次試驗被停止，影響正常測定的同時(shí)，在沒(méi)有冷卻水保護的情況下，對蒸餾裝置具有損傷。

　　3、等1和2確認無(wú)誤后開(kāi)機，儀器自檢，自檢通過(guò)后，儀器進(jìn)入等待選擇程序階段。首先進(jìn)入手動(dòng)模式對滴定器中的氣泡進(jìn)行排除。氣泡的存在會(huì )影響測定結果，因為氣泡進(jìn)入后，會(huì )占據標準滴定酸的體積，使標準滴定酸的體積減小，測定結果偏低。

　　排除氣泡的方法是；首先打開(kāi)儀器前蓋，儀器報警，提示儀器前蓋被打開(kāi)，找一塊小磁鐵放在儀器前面的觸點(diǎn)上，按面板上回車(chē)鍵，此時(shí)儀器默認前蓋關(guān)閉。將儀器功能選擇滴定器充液，滴定器活塞向上移動(dòng)停止后，用收捏住滴定器的塑料軟管，選擇滴定器排空，滴定器活塞向下移動(dòng)，等移動(dòng)3~5秒后立刻松手，滴定器中氣泡將上浮至滴定器上端，選擇滴定器充液，氣泡被排除滴定器，反復2~3次，將氣泡排凈后開(kāi)始測定。

　　4空白的測定

　　在空白測定時(shí)，首先測定水空白，水空白的測定是為了檢查儀器的穩定程度。當前后兩次空白測定值小于0.05且水空白值小于0.2時(shí)，儀器穩定。測定試劑空白，并將空白值輸入儀器。如果不先測定水空白而直接測試劑空白，即在儀器不穩定的情況下就進(jìn)行試劑空白的測定，將會(huì )得到偏高的試劑空白值，測定結果將偏低。

　　5樣品測定

　　5.1稱(chēng)樣

　　牛乳樣品需要混合均勻后取樣，因為牛乳樣品容易脂肪上浮，不事先混合而直接從上層取樣的話(huà)，測定結果將偏低。乳粉樣品混合均勻后用稱(chēng)量紙稱(chēng)量，并用鑷子送如消化管底部。因操作不當殘留在管壁上的樣品，在加入硫酸的時(shí)候用硫酸沖入消化管底部。如果殘留在管壁上而不用硫酸沖入的話(huà)，將會(huì )使測定結果偏低。

　　5.2消化

　　在加酸的過(guò)程中，要考慮到樣品的組成對消耗酸量的影響。酸量小，樣品消化不完，測定結果偏低；酸量大，在上機過(guò)程中與堿中和后酸過(guò)量，游離胺不能被蒸餾出來(lái)，嚴重影響測定結果。所以，要嚴格控制硫酸的用量，表1列出乳中各個(gè)組分對酸的消耗量。

　　6回收率的測定

　　采用硫酸銨和尿素分別對回收率進(jìn)行測定。單純的采用硫酸銨，簡(jiǎn)單快速，不需要消化，但只能保證儀器測定的部分，而不能對前處理的消化過(guò)程進(jìn)行質(zhì)量體系保證。尿素需要消化進(jìn)行測定，對前處理和儀器測定部分全程進(jìn)行質(zhì)量保證。表3和表4分別列出了硫酸銨和尿素的回收率測定結果。